AmpliQ 5x HOT EvaGreen® HRM Mix
Gotowy premix zawierający polimerazę hot-start i barwnik fluorescencyjny EvaGreen® do analiz Real-time PCR HRM (z lub bez barwnika referencyjnego ROX).
AmpliQ 5x HOT EvaGreen® HRM Mix jest gotową do użycia mieszaniną do prowadzenia analizy qPCR i HRM. Premix zawiera wszystkie niezbędne komponenty reakcji, czyli: polimerazę hot-start, mieszaninę ultra czystych dNTPs [10 pmol/µl], MgCl2 oraz barwnik EvaGreen®, umożliwiający detekcję amplifikowanych fragmentów DNA metodą HRM. Aby przygotować reakcję, należy do premixu dodać wodę, startery oraz matrycę DNA.
Polimeraza hot-start jest aktywowana przez 15-minutową inkubację w 95 °C. Ta właściwość uniemożliwia wydłużanie starterów, które hybrydyzują do matrycy w miejscach niespecyficznych oraz zapobiega powstawaniu dimerów starterów w niskiej temperaturze podczas reakcji qPCR.
EvaGreen® jest barwnikiem fluorescencyjnym, który wiąże się ilościowo do dwuniciowego DNA. W przypadku braku dwuniciowego DNA fluorescencja pozostaje na bardzo niskim poziomie (1-4 % false positive). Zakres widma barwnika EvaGreen® jest podobny do barwnika SYBR® Green, jednakże wykazuje on kilka cech czyniących go idealnym do analiz HRM, tj: wysoka stabilność, nie inhibuje reakcji PCR oraz udowodniono, że nie jest mutagenny ani cytotoksyczny. EvaGreen® jest kompatybilny z większością dostępnych platform do analizy Real-time PCR, po ustawieniu tych samych parametrów, jak dla SYBR® Green lub FAM. EvaGreen® jest zarejestrowanym znakiem towarowym firmy BIOTUM, INC.
Skład mieszaniny AmpliQ 5x HOT EvaGreen® HRM Mix
- Bufor reakcyjny 5x EvaGreen® HRM
- MgCl2 12.5 mM
- Mix dNTPs 10 pmol/µl
- Barwnik EvaGreen®
- BSA
- (+/-) barwnik referencyjny ROX.
CENA
1000 reakcji - 1400 zł netto
500 reakcji - 805 zł netto