Wśród metod ilościowego oznaczania stężenia białka C−reaktywnego wymienia się: immunodyfuzję radialną, immunoelektroforezę i immunonefelometrię. Znana jest także metoda turbidynometryczna, oparta na immunoprecypitacji, a w przypadku białek występujących w małych stężeniach metoda radio− lub immunoenzymatyczna. Pod koniec lat 80-tych do diagnostyki klinicznej wdrożono czuły test immunoenzymatyczny ELISA - mikrometodę badawczą, wykorzystywaną w analizie ilościowo−jakościowej wybranych parametrów surowicy krwi. Ponadto do oznaczania białek ostrej fazy wykorzystywane są również: metoda immunoblottingu, test ELISA oraz nowoczesne techniki biologii molekularnej [11].

Oznaczanie CRP za pomocą testów point-of-care (POCT, ang. point-of-care test)

Testy te znane są z prostoty wykonania oznaczenia oraz krótkiego czasu oczekiwania na wynik (ok. 5 minut). Co więcej oprócz CRP, za pomocą testów point-of-care można oznaczyć stężenie wielu innych parametrów biochemicznych np. : glukozy, cholesterolu, D-dimerów, albuminy, hemoglobiny glikowanej czy TSH. Do wykonania testu POC wystarcza niewielka objętość materiału biologicznego (w przypadku oznaczania CRP potrzeba 5 μl krwi). Ma to ogromne znaczenie w przypadku, gdy badanie należy wykonać u noworodka czy niemowlęcia. Minimalna objętość próbki do pomiaru oraz zakres detekcji CRP zależą od rodzaju stosowanego testu POC. Testy do oznaczania białka C- reaktywnego, wykonywane w systemie point-of-care znalazły szczególne zastosowanie w diagnozowaniu zakażeń bakteryjnych i wirusowych [13].

Ilościowe oznaczanie białka CRP in vitro

Dysk z odczynnikami (Piccolo®MetLyte Plus CRP) jest szeroko stosowany w połączeniu z analizatorem biochemicznym Piccolo xpress™ do ilościowego oznaczania in vitro m.in. białka C-reaktywnego. Ponadto możliwe jest również oznaczanie kinazy kreatynowej, kreatyniny, glukozy, potasu, sodu, całkowitego ditlenku węgla i azotu mocznikowego we krwi pełnej i osoczu pobranych z użyciem heparynianu litu lub surowicy. Należy mieć na uwadze, że metoda oznaczania CRP firmy Abaxis nie jest przeznaczona do analiz wymagających dużej czułości.

Metoda stosowana przez firmę Abaxis to immunologiczne oznaczenie turbidymetryczne z zastosowaniem wzmocnionej aglutynacji lateksowej. Badaną próbkę w pierwszym etapie oznaczenia miesza się z zawiesiną mysich przeciwciał monoklonalnych (skierowanych przeciwko ludzkiemu białku CRP) związanych z lateksem. Następnie białko CRP wiąże się z cząstkami przeciwciało-lateks, w wyniku czego zachodzi aglutynacja powodująca zmętnienie próbki. Do oznaczenia ilości białka CRP wykorzystuje się rozpraszanie światła spowodowane zmętnieniem. Stopień zmętnienia mierzy się w postaci zmiany absorbancji. Pomiar dokonywany jest przy długości fal świetlnych wynoszącej λ= 630 nm. Zmiana absorbancji jest wprost proporcjonalna do ilości białka CRP w badanej próbce [14]. 

Cząstki przeciwciało anty-CRP/lateks + CRP    →    zaglutynowane białka CRP z cząstkami przeciwciało anty-CRP/lateks

Keul-o-test^® Kaseta do najlepszego półilościowego testu CRP (oznaczenie dla próbek surowicy, osocza i pełnej krwi)

Keul-o-test jest system testów immunologicznych, które wykorzystywane są do oznaczania białka C-reaktywnego. W skład testu wchodzą odpowiednio dobrane odczynniki, służące do wykonywania pomiarów stężenia białka C-reaktywnego w pełnej krwi za pomocą techniki immunologicznej. Zestaw testowy przeznaczony jest wyłącznie do użytku profesjonalnego.

Półilościowy test CRP jest szybkim testem wykorzystywanym do oznaczania CRP w pełnej krwi, a jego czułość wynosi 10 mg/l białka C-reaktywnego [16].

W skład zestawu do testu CRP wchodzą:

1. Kaseta do testu CRP

2. Mikropipeta o pojemności 10 μl (służąca do pobierania próbki pełnej krwi)

3. Roztwór buforu

4. Probówka służąca do mieszania

5. Zakraplacz do próbek

6. Instrukcje obsługi/analizy wyników